CONCENTRACION de HCM

CONCENTRACION de HCM

CONCENTRACION de HCM

Lic. euáSer Humberto Hernández-Reyes

Instituto de Hematologíhum e InmunologíUMA. La Habana, Cuba.

Se revisan los Antecedentes históricos del surgimiento de la automatización en la rama Hematológica y los principios de detección los Contadores autom utilizados PORáticos de césangu de Lulaíneas, con referencia a su ación combinada en la caracterización de las distintas poblaciones Celulares hemáticas. Se describen los Componentes báSICOS de los analizadores Hematológicos. Se detalla la obtención, Intervalo de referencia y utilidad clíVariáveis ​​nica de las de uso común ofrecidas POR estos equipos en el estudio de los eritrócitos y trombocitos, referidos a los parámetrôs más actualizados en el Estudio de ESTAS Celulares série. En cuanto a los leucócitos, se mencionan los principales parámetrôs Relacionados con el estudio automatizado de uso rutinario, la utilidad de los novedosos principios inmunológicos de detección en la caracterización de esta población Celular, Comoí Como los logros y obstáculos manifiestos Durante el conteo y estudio de las subpoblaciones leucocitarias inmaduras O humómalas. Por último, se exponen las ventajas del OSU de los contadores Hematológicos para el trabajo verdadeira del laboratorio de hematologíUma y la necesidad del conocimiento de sus POTENCIALIDADES diagnósticas POR parte de los médicos, especialmente los Hematólogotipos e inmunólogotipos.

Palabras clave: citometríUma bainhaática, Contadores Hematológicos.

Palavras-chave: hemático citometría, Contadores hematológicos.

El conocimiento sobre los fisiopatol cambiosógicos que acompañhum al proceso salud-enfermedad alcanzado por las ciencias méDicas durante la Segunda mitad del siglo XX fue vertiginoso. Esto se tradujo para la rama de laboratorio clínico, en el surgimiento y puesta en manos de sus profesionales, de un número Cada Vez Maior de determinaciones destinadas a complementar el examen físico y el interrogatorio médico, Paragrafo Finalmente establecer un diagnóstico. La aplicacióN de la mecanización automatizaci y posteriorón del trabajo analítico, aumentó considerablemente las POTENCIALIDADES de procesamiento del laboratorio clínico multidisciplinario y permitió la realización de prefeito n unúmero de determinaciones en tiempo menor, el incremento de los Indicadores de calidad (precisión y exactitud) um cifras Nunca Antes alcanzadas Mediante o manual do trabajo el, la disminución significativa de los costos y el acortamiento en los tiempos de Entrega de los resultados al cliente (médicos pacientes y). 1

La hematologíum, como una de las Principales líneas de trabajo del laboratorio clínico, Não permaneció ajena al desarrollo de la automatización e incrementoó sus POTENCIALIDADES diagnósticas con el surgimiento y perfeccionamiento de los contadores o analizadores Hematológicos.


RESEÑA HISTÓRICA SOBRE EL Proceso de conteo de CÉLulas SanguÍNEAS

El desarrollo del proceso de automatización en el laboratorio clínico fue discreto Durante los siglos XVIII. XIX y primera mitad del XX. Los primeros Reportes sobre el conteo de céLulas hemáticas dadosN del año 1794, cuando utilizando un Dispositivo de lentes rudimentarias se realizó la primera descripción Precisa de los glórojos Bulos. Más tarde, en el siglo XIX. se pudieron observar las plaquetas y diferenciar las subpoblaciones leucocitarias Mediante la tinción con Anilinas. El primário método para el recuento electrónico de césangu de Lulaíneas fue publicado en 1934; en esta técnica el conteo se realizaba Mediante la detección foteléctrica de la luz dispersada. 2

Las POTENCIALIDADES de estos procedimientos NÃO encontraron en aquella época aplicación en la hematologíUMA. No fue hasta 1956, luego de La Segunda guerra mundial, que ante la escasez de calificado Pessoal, el aumento de la carga de trabajo y la necesidad en los laboratorios de hematologíhum de ofrecer un recuento celular Cada Vez más fiable y rápido, se diseñó el primário contador automático de céLulas utilizando los modelos creados en humñAnteriores OS. Esto representamó el nacimiento del primário contador Relha modelo A. 1-4

Los primeros Contadores Celulares, aunque constituyeron Importante avance un, eran de solo de capaces de electr Realizar conteosónicos globales de eritrócitos y Menos satisfactoriamente, de leucócitos; NÃO obstante, marcaron la ruta para la innovación y perfeccionamiento de varias Gerações de estos equipos. El surgimiento y desarrollo de los Programas informaráticos, los ordenadores, la robotización, la mecanización y Diversos métodos de detección, entre otras TecnologíComo, han contribuido al aumento de las POTENCIALIDADES de estos equipos.

En la actualidad, los Contadores Hematológicos han incrementado significativamente la capacidad de humáHomens amplios lisis y presentanús de determinaciones, Elevada complejidad electrónico-mecáNica y prefeito productividad en el procesamiento de Muestras. De este modo, se han convertido en una poderosa Ferramenta en la orientación diagnóstica, pronóstica y Terapéutica de los trastornos Hematológicos. 1-3

La influencia del desarrollo Tecnológico sobre los contadores Celulares ha posibilitado el surgimiento de una gran diversidad de modelos. De: Não obstante, todos estos equipos exhiben un diseño mecánico y electrónico semelhante. En la figura 1 se muestra el Esquema básico de Hematol un contadorógico.

Componentes báSICOS Hematol un de contadorógico 2

Diluidor. Sistema que Recolher la concentración de las césangu de Lulaíneas y las suspende en soluciones conductoras ISOTónicas Paragrafo adecuarla a las Capacidades de Medida del Dispositivo.

aspirador. Sistema Que toma la muestra diluida y la Conduzir hacia el Dispositivo de Medida.

Sistema de Fluidos. transporta las SUSPENSIONES Celulares hacia el Dispositivo de Medida o la cámara de recuento.

Cámara de recuento o Dispositivo de Medida. constituye la parte central, o zona sensible del equipo, donde ocurren los fenóMenos ópticos, eléeléctricos o Ambos, medidos posteriormente.

detector o Transdutor. Filho los Dispositivos que linealmente generan pulsos eléeléctricos cuando las céLulas pasan la zona Sensível, óptica o eléeléctricos, del equipo.

Discriminador. discrimina los pulsos elégenerados ELÉCTRICOS por los transductores en correspondencia con el tipo celular medido.

Amplificador. amplifica la señal eléctrica que sale del discriminador para su posterior procesamiento.

conversor analógico digitais. convierte las señales eléctricas en digitales.

ordenador. procesa las señales digitales y las convierte en datos Que Serán Mostrar resultados Resultados en pantalla y que pueden impresos Ser.

La parte electrónica del equipo está compuesta por el amplificador, el convertidor y el ordenador.

la mayoríhum de los analizadores Hematológicos actuales disponen de la incorporación de ordenadores o microprocesadores que automáticamente o Mediante una mínima interacción con el Operador, dirigen y el controlan Braço funcionamientoónico Entre todos los Componentes del sistema, procesan las señales ofrecidas por los Sistemas de detección, garantizan la rapidez de procesamiento, el control de calidad y la confección de Listas de trabajo. Además, controlan el accionar de toda una serie de Dispositivos Destinados a Indicar fallas o Demandas del sistema, Como pueden Ser las necesidades de mantenimiento, el agotamiento o contaminación de los Reactivos, la Apresentação,ón de Muestras NÃO óOptimas para su procesamiento, etc. filho Las Fallas Durante el procesamiento Generalmente indicadas Mediante mensajes en pantalla o hum través de una señAl o Visual Sonora. 1-4


Principios Generales de DETECCIÓN UTILIZADOS POR LOS CONTADORES O ANALIZADORES HematolÓgicos

Medida de la variación de impedancia o resistencia eléctrica (principio Relha )

Las céLulas de una muestra de sangre totais de diluida en una solución electrolítica se hacen pasar, una DETRás de la otra, um través de una abertura de Determinado diámetro, por la Que circula una corriente eléctrica de cierta intensidad inducida POR 2 Electrodos dispuestos a Ambos Lados de la abertura u orificio. Al pasar Cada célula hum través del orificio causa un cambio en la resistencia eléctrica que GENEROS un pulso de voltaje cuya altura o amplitud Sorá proporcional al tamaño o volumen la célula. El número de pulsos eléeléctricos generados se relaciona con la cantidad de céLulas que atraviesan la abertura. Dentro de las ventajas de esta Tecnologíhum se Citan su sencillez, costo bajo, la posibilidad de poderse aplicar humún en los Instrumentos más pequeñOS y su Marcada utilidad para la Medición de los volúMenes Celulares. En la actualidad, este principio se aplică Como méTODO de referencia Paragrafo hem el celular recuentoático y la Medición de los volúMenes (tamaño) de Cada población celular. Es Utilizado por la mayoríhum de los Fabricantes de contadores Hematológicos debido a Marcada reproducibilidad su, rapidez y disminución del estad Erroístico. 2-5


Medición de la cantidad de luz dispersada (méfaçam óptico)

La Medición de la intensidad de luz dispersada es utilizada frecuentemente por los contadores Celulares en sus Mediciones. Las céLulas en suspensión se hacen pasar una alineadamente DETRás de otra, um través de una pequeñUma zona sobre la que incidem un haz de luz hal perpendicularmenteógena o lásor, lo que provoca la interrupcióN y dispersión lumínica de la energíhum radiante en Diversos ángulos. El número de Interacciones del haz de luz se corresponde con la cantidad de céLulas que pasan por la zona de sensible del aparato y la magnitud de su dispersión Será FUNCI unaón de distintas propiedades o características Celulares, Dentro de las que pueden citarse el volumen celular, el tamaño, el contorno y el índice de refracción Que constituye una FUNCIón del contenido celular (presencia de granulaciones, coloracióN, lobularidad nuclear, Entre otros). 2,4-6

Para la detección de la luz dispersa se utilizan varios detectores colocados en Diversos ángulos con respecto al Haz incidente. La Fracción luz dispersada en un áNgulo cónico entre 0-10 o. Que casi coincidem con la Dirección del haz incidente, sorá proporcional al volumen celular. Por Lado otro, la Fracción de luz dispersada perpendicularmente con respecto al Haz incidente, sorá FUNCI unaón de la complejidad de la estructura intracelular. 2,4-6

La incorporación de una fuente de luz láSer y la Medición de su dispersión, de Modo semelhante a la utilizada en las técnicas de citometríhum de flujo, ha conferido mayor calidad a las determinaciones y posibilitado la incorporación de nuevos índices hematiméTricos Uma existentes los ya. Cabe destacar que ACTUALMENTE Nenhum filho todos los Contadores los que cuentan con ESTA TecnologíUMA. 4-6

El méfaçam óptico encuentra su aplicaci principaisón en la realización automática del recuento diferencial de leucócitos y en el estudio de la composición interna de las céLulas, aunque También se aplică en la realización de los conteos globales y Medición de los volúMenes Celulares. 4,6

Técnicas inmunológicas Mediante anticuerpos monoclonales (AcMo) Acoplados a fluorocromos (citometríhum de flujo)

en los últimos humñOS se han INCORPORADO los métodos de detección inmunolóGica en los autoanalizadotes. estas técnicas Integran la dispersión de luz con la emisíóN de fluorescencia (488 nm láSer-azul), de Modo semelhante a cit losómetros de flujo convencionales. La combinacióN de la TecnologíUma óptica con la detección de fluorescencia Mediante el Uso de AcMo marcados con fluorocromos Aplicada a los autoanalizadores Hematológicos, ha supuesto un claro avance en la discriminación de las distintas subpoblaciones Celulares Hematológicas. 2,4,5

En la técnica de citometríhum de flujo las céLulas en suspensión se hacen pasar una alineadamente a una, POR delante de un haz de luz láMonocrom Sorático, lo que causa su dispersión en Diversos ángulos y la emisíón de energíUma fluorescente, previo marcaje de las estructuras Celulares con anticuerpos monoclonales Acoplados a fluorocromos. La utilización de una fuente de luz lásor, Generalmente de argón, ofrece un rayo Monocromático más intenso, más colimado y Capaz de inducir la excitación de ciertos compuestos (fluorocromos) con la consecuente induccióN de la SEñal fluorescente, lo que garantiza una Medición fotoMétrica más exacta. 4,7,8

La interacción de haz láSer con Cada célula Marcada Produzir 2 Tipos de señales: de dispersión y de fluorescencia. Para su detección, las señales de dispersión se dividen en 2 fracciones: Fracción dispersa áNgulo estrecho (0-10 0) hacia adelante en o frontal Dispersão (FSC), y Fracción dispersa en áNgulo de 90 0 con respecto al Haz incidente o Side Scatter (SSC), las Ser queán Recogidas POR 2 detectores de dispersióN colocados ai efecto (Fig. 2). 4,7,8

Las señales de fluorescencia Során Recogidas POR 3 detectores de fluorescencia en equipos de un solo de de láSer y por un detector cuarto en equipos de 2 láSeres. La posibilidad de utilizar varios detectores para la recogida de las señales ofrecidas por la fuente de luz láSer al interactuar con Cada célula, proporciona al unísono 2 parámetros de dispersión y 3, e incluso 4, de fluorescencia (FL1, FL2 y FL3) POR Cada célula analizada. caracter esteística de la citometríhum de flujo la convierte en una poderosa técnica multiparamétrica al ofrecer simultáneamente varios paráSobre metros Cada célula y la relación de estos parámetros con los de otra célula También analizada. 4,7,8

Gracias a su Elevada especificidad, Mediante la citometríhum de flujo se pueden estudiar varias poblaciones Celulares Diferentes y detectar la presencia de una subpoblación dada en muestras donde predominen otras poblaciones Celulares mayoritarias. 2,9

En la práctica médica Hematológica e inmunológica, este principio encuentra aplicación en el conteo e identificación de subpoblaciones linfocitarias (inmunofenotipo), estudios de FUNCIón plaquetária, determinación de reticulocitos inmaduros y en la caracterización de las leucemias agudas y síndromes mieloproliferativos, entre otras. 2,8-10

Aunque se ha hecho referencia a los principios de Medición Que Generalmente se ponen en práctica, es bueno destacar que en ocasiones estos se combinan en un mismo analizador con otros métodos de deteccióN y caracterización celular, o filho como la citoquímica (tinción de peroxidase, negro SudáN, etc), La detección de la conductividad o radiofrequência y el Umaálisis de núCleos, previa lisis leucocitaria. 2,4

Por parte otra, estos equipos disponen de MECANISMOS Paragrafo Evitar los errores de coincidencia, que tienen lugar cuando 2 céLulas atraviesan al mismo tiempo la zona de Sensora o al pasar repetidas veces la misma cézona lula POR dicha. Para Evitar los errores de coincidencia se aplican TecnologíComo Como el diseño o enfoque hidrodinámico y el flujo de barrido. 2,4,7

Con el diseño hidrodinámico se logra que las céLulas disueltas en la corriente salina transportadora penetren en la cámara de Medición de forma cónica estrechada hasta unos 20 m m. El flujo de barrido consiste do fazer en el flujo perpendicular de una corriente estacionaria de Diluyente POR DETRás de las aberturas destinadas al recuento celular Para Evitar Que dichas céLulas sean removidas de la zona de detección una vez Atravesada. 2,4,7

A Partir de las señales generadas por los detectores y procesadas automáticamente si presentan en pantalla las Representaciones gráficas de las distintas poblaciones Celulares Mediante citogramas e histogramas. En estos gráFICOs, las poblaciones Celulares filho Representadas Sobre un eje de coordenadas X / Y Mediante agrupaciones homogéneas de puntos de acuerdo con sus características físicas de dispersión, fluorescencia o Ambas. Los histogramas o citogramas de un solo de de parámetro proporcionan información sobre el número de céLulas que expresan un par de solo deámetro y la intensidad con que lo expresan. De: Não obstante, la mayoríhum de los citogramas relacionan 2 e 3 incluso parámetrôs Paragrafo poblaci una mismaón celular. 2,4,7,10


utilidad CLÍNICA DE LOS PARÁMETROS ERITROCITARIOS DE LA CITOMETRÍUma bainhaÁTICA automatizada

La determinación del número de eritrócitos, la concentración de hemoglobina y la detección de las alteraciones morfológicas de la serie roja (eritrócitos), constituyen casi Inevitablemente las primeras indicaciones cuando se desea evaluar la magnitud y Causas de la anemia. Como parte de la citometríUma bainhaática automatizada, se realizan una serie de Mediciones que ponen en manos del clínico un grupo de paráO metros índices eritrocitarios Destinados a facilitar el adecuado diagnóstico, Dentro de las Que se Citan:

– MedicióN de la concentración de hemoglobina (Hb). Mediante el refinamiento del método de cianometahemoglobina, los analizadores Hematológicos han exhibido estándares de confiabilidad muy Superiores a los alcanzados por los métodos manuales, lo que le confiere superioridad a la determinación automatizada. 2,5,6 Otro de los métodos descritos para la determinacióN de la concentración de hemoglobina se basa en la Medición de la cantidad de de luz láSer dispersada, técnica descrita en 1986 y Aplicada en la actualidad. 6

– Recuento de glórojos Bulos. Generalmente se Realiza aplicando as como el principio Relha, aunque se puede determinar POR dispersión de la luz o la combinación de Ambos. 2,6,11 A partir del número de céLulas contadas POR unidad de volumen se genera el histograma de distribución de eritrócitos, Que se muestra gráficamente (Fig. 2).

– HematóCríton (HCT). puede ser calculado relacionando el volumen medio corpuscular (VCM) con el recuento de glóBulos rojos o medido como la Sumatoria de los volúMenes Celulares de una muestra fija. 4,11

Las determinaciones como as antes descritas se conocen Como índices eritrocitarios báSICOS o Primarios y a aquellos que Derivan de ellos se les conoce Como parámetrôs Derivados o secundarios; hum continuación se exponen algunos de ellos: 2,4,5,11

– Volumen medio corpuscular (VCM): en términos ABSOLUTOS informaci ofrece unaón sobre el volumen promedio de los eritrócitos. Los Valores de referencia filho de 82-95 fl. El valor de este parámetro puede ser obtenido a partir del histograma de distribución de volumen de los eritrócitos (Fig. 2) o medido Directamente Mediante la técnica de dispersión de la luz lásor, lo que ha significado un avance Notável. 4,6,11

Atendiendo a los resultados de esta Variável se lleva a cabo la clasificación morfológica de la anemias, lo que ha Permitido desarrollar estrategias en el diagnóstico de estas Entidades. 1,11,12 Debe aclararse Que a pesar de su importancia, el VCM sem caracter informa Sobreísticas morfológicas distintas al tamaño eritrocitario ni sobre la coexistencia en una misma muestra de poblaciones heterogéneas en cuanto hum volumen celular. Por raz ESTAón, A Partir de la curva de distribucióbase de n de frecuencias o histograma Elaborado Tomando Como de las Medidas repetidas de los volúMenes Celulares individuales, se obtiene el coeficiente de variación alrededor de la media correspondiente. Este parámetro se conoce Como ancho de distribución de los glórojos Bulos (RDW-CV) o amplitud de la curva de distribución de los eritrócitos (ADE) y sí es una Medida fiel del grado de Anisocitose en la muestra. En algunos analizadores este parámetro se Expresa en femtolitros, como la desviación estáNdar de la curva de distribución de eritrócitos (RDW-DS) Que corresponde al 20% POR encima de la líde base de nea del histograma. A ESTA altura es donde se encuentra el mayor grado de variación en el tamaño de las céLulas. 5,6,11

Los Valores del VCM filho úTelhas en la clasificación de las anemias MicroCíticas, macrocíticas y normocíticas. 1,11,12 La relación entre los Valores del VCM y el RDW Resulta sumamente Importante en el Diagnóstico diferencial entre la anemia ferripriva y las talasemias (tabla 1).

De hecho, se han nuevas clasificaciones propuesto de las anemias basados ​​en la utilización exclusiva del VCM y del RDW. 6 La clasificación de las anemias propuesta POR algunos Autores sugiere que la ferropenia y la b -talasemia podíhum distinguirse en base de de al valor del RDW, siempre más Elevado en la primera normais y en la talasemia. Estudios posteriores demostraron que lo mientras primero se cumplíhum prácticamente siempre eis Segundo solo en el 50% de los Casos (tabla 1).

También es conocido que el RDW está muy aumentado en la db -talasemia, siendo superior de al de la anemia ferrop deénica. De: Não obstante, una diferencia de Fundamentos entre la ferropenia y la b -talasemia corresponde al porcentaje de Hematíes MicroCíticos (MICRO%) e hipocrómicos (HIPO%). En la ferropenia Existe siempre un aumento de Hematíes hipocrómicos (30,7%) que es menor en la talasemia (13-14%), la que se caracteriza por un aumento de los Hematíes MicroCíticos (31-33%) NÃO tan acusado en la ferropenia (17%) (tabla 1). 6,13,14

La hum -talasemia homocigótica posee muy VCM un semelhante al de la ferropenia y aumentado RDW un, con aunque Valores próximos a la normalidad. Las diferencias con la anemia ferropénica están en el número de Hematíes hipocrómicos, que coincidem con el resto de talasemias y con estas últimas, en que sus Valores de microcitos filho muy SIMILARES a los obtenidos en la ferropenia (tabla 1). 6,13

Los Valores de VCM aumentan en la anemia megaloblástica y en eritroenziomopatíComo Como el déficit de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa (G6PD) y de piruvato cinasa (PK). Por otro lado, disminuyen en la esferocitosis hereditária y en la hum -talasemia homocigótica (tabla 2). 6,11


– media corpuscular de hemoglobina (HCM):
es el valor promedio de la hemoglobina contenida en cada eritrocito. Sus Valores de referencia filho de 28-32 pg. Se Calcula a partir del valor de hemoglobina y del recuento de eritrócitos. Valores Menores de 27 pg se observan en anemias MicroCíticas, mientras que Valores mayores hum filho de 35 pg tíPicos macroc de anemiasíticas. 11,12

– Concentraciómedia corpuscular n de hemoglobina (CHCM). se refiere a la concentración promedio de hemoglobina POR mililitro (ml) de eritrócitos. En Adultos, los Valores de referencia filho 32-36%. Puede ser calculada utilizando los Valores de hemoglobina y de HematóCríton o Medida Directamente Mediante luz láSer y su dispersi gradoón. 6,11,15

A Partir de su Medición directa se obtiene el histograma de distribución de eritrócitos según su concentración de hemoglobina corpuscular Média y la amplitud de distribución de los Hematíes (ADH) según su concentración de hemoglobina, conocida por sus siglas en ingles Como HDW (Largura de Distribuição de hemoglobina ). 6,11,15

La CHCM disminuye en la anemia ferropéNica y en la hum -talasemia homocigótica y aumenta en la esferocitosis hereditária, eliptocitosis congénita y en la xerocitosis congénita. El aumento de la CHCM observado en la esferocitosis hereditária y en la eliptocitosis, se acompañUma de Valores Elevados del RDW y de la HDW.

La anemia megaloblástica cursa con valores de CHCM dentro del Intervalo de referencia; obstante NÃO, muestra cifras RDW y de HDW Elevadas (tabla 2). 6,12,15

Sobre la de Base de Valores de CHCM, la sangre puede ser clasificada Como nomocrómica, hipocrómica o hipercrómica. 11

Otros parámetrôs Relacionados con el diagnóstico diferencial de Distintos Tipos de anemias ofrecidos POR estos equipos, filho los Porcentajes globales de Hematíes macrocíticos, MicroCíticos, normocrómicos, hipercrómicos e hipocróMicos, Quantoí como el cociente de céLulas MicroCíticas-hipocrómicas (M / H). Este último constituye un parámetro Importante para la diferenciaciótalas rasgo n entreémico y anemia POR deficiencia de hierro, al Mostrar Valores Menores que 0,9 en la anemia ferropéNica y talas rasgo mayores en elémico (tabla 1). La relación Entre estos parámetrôs permite conocer qué porcentaje de la población de Hematíes clasificada Como MicroCítica es hipocrómica, normocrómica e hipercrómica; y de la población de Hematíes hipocrómicos, qué porcentaje Existirá de macrocitos, microcitos y normocitos. 6,11,13

– La medida del contenido de hemoglobina Presente en los reticulocitos (CDH) es otro parámetro de reciente incorporación ofrecido por los analizadores Hematológicos. Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es mucho más sensata a la suplementación con hierro Que otros parámetrôs, contos Como HematóCríton, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina (ESTA última puede presentar Variaciones en inflamatorio proceso un). 1,11

La evaluacióN de la efectividad de la actividad eritropoyética en Diversas hemopatíComo y posterior al tratamiento, es caracterizada en los Contadores de través de Diversas Variáveis ​​Relacionadas con el recuento y caracterización de los reticulocitos, Dentro de las Que se Citan: recuentos ABSOLUTOS y porcentuales de reticulocitos (RET # y RET%, respectivamente), reticulocitos con bajo contenido en ARN (RET L), medio (RET M) y alto (RET H) ; volumen medio reticulocitario (VRM), Fracción de reticulocitos inmaduros (FRI) y el recuento de reticulocitos corregido (CRC). 4,11,16

utilidad CLÍNICA DE LOS PARÁMETROS PLAQUETARIOS DE LA CITOMETRÍUma bainhaÁTICA automatizada

– Plaquetas (PLT): se refiere al recuento global de plaquetas Realizado de forma automatizada. Sus Valores de referencia varíUma Casa de relación con la técnica utilizada para su recuento, fluct Generalmente aunqueúhum des 150 a 400 × 10 9/4 L.

– Plaquetocrito (PCT). se Calcula relacionando el recuento de céLulas con el volumen medio plaquetario. Ofrece un Estimado sobre la Fracción del volumen sanguíPOR total de neo de Ocupada las plaquetas e incrementa sus Valores en todos aquellos Estados fisiológicos o patológicos que cursen con trombocitosis, Aumentos del volumen medio plaquetario o Ambos. Sus cifras de referencia oscilan para hombres y mujeres de 0,1 a 0,4%. 11,17

– Índice distribución plaquetario (IDP) o ancho de la distribución del volumen plaquetario. (PDW). se Calcula A Partir de la curva de distribución de volumen de las plaquetas (fig. 2) y refleja el grado de variación morfológica de las plaquetas. Sus Valores de referencia para hombres y mujeres oscilan de 0 a 18. 11,17

– Plaquetas reticuladas (PR). las PR Filho las más JóVenes de la sangre Periférica con un contenido de ARN Superiores a las demás. Filho detectadas Mediante la aplicación del méTODO inmunológico. Las plaquetas se tiñen con ARN fluorescente (auramina O) y la intensidad de fluorescencia Determina el contenido del ARN de la plaqueta. El porcentaje Normais de PR es de 0,98 0,41%, según Autores. 17,20,21

El recuento absoluto aumenta en pacientes con trombocitosis POR hiperproducción (PTI) y en las aut trombocitosisónomas NÃO reactivas (trombocitemia esencial y leucemia mieloide crónica), y disminuye en las enfermedades que Cursan con trombocitopenias secundarias hum hipoproducción (causada POR quimioterapia o en la anemia aplástica), lo que APORTA información sobre la trombopoyesis medular (tabla 3). 17,20,21

Se ha detectado un aumento de PR y de las plaquetas Grandes en la trombocitopenia inmune crónica, LO QUE SE correlaciona Positivamente con los anticuerpos antiplaquetarios y También con la recuperación hematopoyética precoz postrasplante de progenitores hematopoyéticos (tabla 3). 11,17,21


Logros Y OBSTÁCulos EN EL recuento DIFERENCIAL AUTOMATIZADO

Mediante la combinación de los principios de Medición habituales (variación de la impedancia y dispersión de la luz) con la radiofrequência, la citoquímica y el Umaálisis de núCleos previa Lisis leucocitaria, los analizadores Hematológicos actuales filho capaces de Realizar el Conteo global de leucócitos y ofrecer cifras Absolutas y porcentuales de las distintas Variedades leucocitarias: linfócitos, neutrófilos, eosinaófilos, monócitos y basófilos. También muestran gráficamente citogramas e histogramas de distribución de volumen Relacionado con otras propiedades Celulares como la actividad peroxidase y el número de Integrantes de Cada subpoblación celular, respectivamente.

La incorporación de las técnicas inmunológicas y la citometríhum de flujo ha posibilitado, además, Contar, clasificar y avisar sobre la existencia de céLulas anormales e inmaduras en sangre Periférica, médula ómar y otros líquidos biológicos. 4,10,11

Para la cuantificación de granulocitos inmaduros (metamielocitos, mielocitos y promielocitos) se han Utilizado Diversos Marcadores monoclonales como el CD16 (Fc RIII g) Que se Expresa en los neutróFilos maduros, CD11b (CR3) expresado solo en neutróinmaduros Filos y el CD64 (Fc g RI), expresado en neutróestimulados Filos. La expresión de estos Marcadores NÃO siempre se corresponde con los morfol cambiosógicos Que se EsperaríUma Durante Encontrar la observación microscópica del frotis teñeu faço; además, existen Diversas Situaciones en las que los granulocitos muestran una expresión humómala de estos Marcadores (síndromes mielodispláSICOS). Esto dificulta su implantación en los analizadores y la solución Parece pasar por la combinación de varios de ellos, lo que encareceríhum mucho su USO Paragrafo utilizarlos de forma rutinaria. 4,22,23

Algo semelhante ocurre con los Blastos, en los que no existe un marcador único para su identificacióN, que hace necesaria la combinación de varios de ellos según la enfermedad de Que se trate. Diversos trabajos demuestran la utilidad del CD45 Paragrafo Poder separar los Blastos de los linfocitos en la zona de baja granularidad celular, debido a la Alta expresión de este marcador en estos últimos, filho pero necesarias Diversas combinaciones de anticuerpos monoclonales para su Correcta cuantificación. 10,22

La cuantificación de poblaciones linfocitarias es una realidad. En la actualidad, es posible el recuento de CD3 / CD4 / CD8 en Hematol analizador unógico. existen métodos de citometríhum de flujo que con la utilización de distintas combinaciones de anticuerpos monoclonales filho capaces de identificar hasta 9 poblaciones linfocitarias y que, en Teoríhum, podríhum utilizarse en los analizadores Hematológicos. Lo que Parece claro es que la cuantificación de estas poblaciones patológicas Requiere necesariamente de la combinacióN de la citometríhum de flujo con los principios de detección habituales y POR ESTA razón, se debe trabajar Paragrafo que en el futuro próximo todos los analizadores Hematológicos incorporen este principio de detección. 4,10,23

La hematimetríhum automatizada llevada a cabo por los analizadores Hematológicos contribuye de un de Modo rápido, Preciso y relativamente barato, Uma poner en manos de los médicos un número Cada Vez prefeito de parámetrôs Destinados a orientaci ofrecer unaón diagnóstica y pronóstica más fiable y en el tiempo menor posible.

La combinación de las técnicas automáticas de impedancia, óptica e inmunológica Aplicadas al hemograma, han posibilitado la incorporación de nuevos parámetrôs en la caracterización de las Celulares hematopoy sérieéticas, lo que da lugar a toda una generación de hemogramas que incluye de los más simples, hasta los que hoy ofrecen los más novedosos parámetros. El desarrollo Tecnológico en el campo de la hematologíhum, La inmunologíUma y la terapia transfusional cobra hoy más fuerza, que nunca y tendrá Inevitablemente Que Ser enfrentado POR todos los profesionales, quienes tienen la responsabilidad de prepararse Paragrafo ello. En particular, los Hematólogotipos e inmunólogotipos Deberán conocer la contribución desde el punto de vista diagnóstico, pronóstico y Terapéutico de las Variáveis ​​aportadas por los actuales contadores Hematológicos, lo que contribuirá hum Eliminar muchas peticiones de humáinnecesarias Lisis, facilitará el diagnóstico diferencial, la orientación de pruebas diagnósticas Realmente necesarias para el paciente y reducirá significativamente el costo económico.

1. Cruz-Rodríguez C. Automatización del laboratorio clínico. En: Suardíaz JH, Cruz CL, Colina AJ. Laboratorio Clínico. La Habana: Ciencias MéDicas; 2004. p. 56-9.

3. Um Bentahar, Izasa SA. Nuevas aplicaciones clínicas en los analizadores Hematológicos da série LH. Haematologica (ed. Española). 2006; 91 (Supl 1): 146-9.

4. Villlarrubia J. Avances en el leucocitario automatizado diferencial. Criterios para la revisión del hemograma Y SISTEMAS expertos de validación automática. Haematologica (edición española) 2002 Oct; 87 (Supl 1): 138-42.

5. Lewis SM, Bain J, Bates I ed. Dacie e Lewis: Hematologia Prática. 10ª ed. Filadélfia: Churchill Livingston Elsevier; De 2006.

6. Juo JM. UMAálisis automatizado de las poblaciones eritrocitarias: su aplicación en el diagnóstico de las anemias. Haematologica (ed. Española). 2002 Oct; 87 (Supl 1): 120-34.

7. Orfao A, Ruiz A. Citometríhum de flujo y su aplicación en HematologíUMA. En: López Borrasca A, ed. Enciclopedia Iberoamericana de HematologíUma I. Salamanca: Ediciones Universidad de Salamanca; 1992. p. 161-75.

8. Barrera-Ramírez LM, Drago-Serrano ME, Pérez-Ramos J, Zamora AC, Gómez-Arroyo F, Saínz-EspuñES TR, et ai. Citometríhum de flujo: Vínculo entre la investigación básica y la aplicación clínica. Rev Inst Nac Enf Resp. 2004 Ene-Mar; 17 (1): 42-55.

9. Kratz A. Fluxo de Análise baseada citometría não Laboratório de Hematologia de Rotina. Haematologica (ed. Española). 2006; 91 (Supl 1): 144-6.

10. Lacombe F, Robert H, VéRIAC S, D Lefevre, Coloração diferencial de leucócitos usando Belloc F. tiazole laranja e Análise de citometría de flo. Aplicação a Um Novo Analisador de Celulas 5 População. Haematologica (ed. Española). 2006; 91 (Supl 1): 143-4.

12. Almaguer-Gaona C. Interpretación clínica de la biometríUma bainhaática. Medicina Universitaria. 2003; 5 (18): 35-40.

13. D’Onofrio L, L Zini, Ricerca BM. Medição automatizada de microcitose de Globulos Vermelhos e hipocromia em Deficiência de ferro e traço -thalasemia b. Arch Pathol Med Lab. 1992 Jan; 116 (1): 84-9.

16. D’Onofrio G, Zini G. Aplicações Clínicas de Novos Parâmetros de reticulócitos. Haematologica (ed. Española). 2002 Oct; 87 (Supl 1): 134-8.

17. Molero-Labarta T, Lemes-Castellano A, de la Iglesia-Iñigo S, Santana-Rodríguez A. Nuevos índices plaquetarios: valor en el diagnóstico y trascendencia en las decisiones Terapéuticas. Haematologica (ed. Española). 2002 Oct; 87 (Supl 1): 115-20.

18. O’Malley T, Ludlam CA, Fox KA, Elton RA. Medição do volume de plaquetas de cantar Uma Variedade de Diferentes Misturas de anticoagulantes e antiagregantes plaquetários. Sangue Coagul Fibrinolyisis. 1996 Jun; 7 (4): 431-6.

19. Jaremo P, Densidade Sandberg-Gertzen H. plaquetas e * Tamanho na Doença inflamatoria do intestino. Thromb Haemost. 1996; 77 (1): 218-9.

20. Hinzmann R. A Utilidade Clínica da Quantificação de plaquetas imaturas. Haematologica (ed. Española). 2006; 91 (Supl 1): 149-53.

21. Takubo T, Yamane T, Hino M, Ohta K, Koh KR, Tatsumi N. O significado clínico da Medição simultánea de plaquetas reticuladas e plaquetas Grandes em púrpura trombocitopénica idiopática. Haematologia. 2000; 30 (3): 183-92.

22. Molero-Labarta T, Lemes-Castellano A, de la Iglesia-Iñigo S. extensión de las aptidões analíticas del Cell-DYN SAPPHIRE Mediante el Uso de Marcadores linfoides. Haematologica (ed. Española). 2006; 91 (Supl 1): 139-42.

23. Fujimoto H, Sakata T, Y Hamaguchi, Shiga S, Tohyama K, Ichiyama S, et al. Fluxo Método de citometría parágrafo contagem e classificação das Populações de granulócitos imaturos reativos. Citometría. 2000; 42: 371-8.

Lic. euáSer Humberto Hernández-Reyes. Instituto de Hematologíhum e InmunologíUMA. Apartado 8070, CP 10800. La Habana, Cuba. Tel (537) 643 8695, 8268, Fax: (537) 644 2334. Correo electrónico: rchematologia@infomed.sld.cu
Local na Rede Internet. http://www.sld.cu/sitios/ihi

Calle 23 # 654 entre D y E, Vedado
Ciudad de La Habana, 10400 CP
Cuba

ecimed@infomed.sld.cu

mensagens Relacionados

  • CONCENTRACION de HCM

    Análisis de sangre, normales Valores. ANALISIS de sangre: Es el análisis de fluido corporal mas importante de todos. En la sangre si Transporta oxígeno hasta las Células, SE Produzir el ataque …

  • CONCENTRACION de HCM

    Un hemograma o conteo sanguíneo completo (CSC) es un análisis de sangre común que De Dinamarca información sobre las celulas sanguíneas: Globulos rojos, Globulos blancos plaquetas y. Hematíes (Globulos …

  • Hemoglobina corpuscular média (HCM), CONCENTRACION de HCM.

    La hemoglobina corpuscular média (HCM) es un Laboratório de Investigação efectuado do Pará valorar rojos los Globulos. Es una Medida de la concentración Meios de hemoglobina Presente en las …

  • Cómo se tratan las metástasis … 4

    Esta información Representação los puntos de vista de los Medicos y del Pessoal de Enfermagem que prestan servicio en la Junta Editorial del Banco de Datos de Información de la Sociedad Americana …

  • Cómo se diagnostica el sarcoma …

    sarcomas algunos uterinos se diagnostican Durante o después de una cirugía Que se realizo Porque se CREIA que eran Tumores benignos fibroides. Sin embargo, la mayoría se diagnostica a causa de …

  • Cómo canto para dormir mejor 9 …

    Pasos Editar Reconoce las comidas y las Bebidas que podrían afectar tus posibilidades para dormir. Antes de elegir las comidas y las Bebidas que puedan ayudarte a dormir, es Eliminar vital de …